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高壓蒸汽滅菌器操作步驟及注意事項

更新時間:2019-03-04   點擊次數(shù):1723次
  高壓蒸汽滅菌器操作步驟
  1.首先將內(nèi)層滅菌桶取出,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。
  2.放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠,以免妨礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
  3.加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。
  4.用電爐或煤氣加熱,并同時打開排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣*排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,維持壓力至所需時間。本實驗用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分鐘滅菌。
  5.滅菌所需時間到后,切斷電源或關(guān)閉煤氣,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當壓力表的壓力降至0時,打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。
  6.將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時,經(jīng)檢查若無雜菌生長,即可待用。
  高壓蒸汽滅菌器注意事項
  注意:*排除鍋內(nèi)空氣,使鍋內(nèi)全部是水蒸氣,滅菌才能*。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,使鍋內(nèi)均勻升溫,保證滅菌*。常用方法是:關(guān)閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05MPa時,打開放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后,壓力表上升達到0.1MPa時,開始計時,維持壓力0.1~0.15MPa 20分鐘。
  到達保壓時間后,即可切斷電源,在壓力降到0.05MPa,可緩慢放出蒸氣,應注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢。當壓力降到零后,才能開蓋,取出培養(yǎng)基,擺在平臺上,以待冷凝。不可久不放氣,引起培養(yǎng)基成分變化,以至培養(yǎng)基無法擺斜面 。一旦放置過久,由于鍋爐內(nèi)有負壓,蓋子打不開,只要將放氣閥打開,大氣壓入,內(nèi)外壓力平衡,蓋子便易打開了。
  對高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具,可以延長滅菌時間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴格遵守保壓時間,既要保壓*,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長時間。

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